传说喝下耶稣在《最后的晚餐》年用过的圣杯里的水可以长生不老。在一次掘金活动中，发现了一块记录圣杯的石碑。圣杯的存在可能会吸引一大批疯狂的人去寻找。琼斯博士(哈里森福特饰)就是其中之一，就连他的父亲老琼斯(肖恩康纳利饰)也深陷其中。但他留给琼斯一张圣杯的纸条，然后就消失了。踏上威尼斯的土地后，琼斯约见了斯奈德医生(艾莉森杜迪饰)。他们通过图书馆里的线索找到圣盾后，就开始被十字剑的兄弟们追杀。几经周折，琼斯终于找到了以前的琼斯。与此同时，斯奈德的纳粹身份被曝光，他的笔记也被拿走。圣杯随时可能落入纳粹手中。于是，琼斯父子开始上演了一场精彩的大戏，共同拯救圣杯！